细胞损伤与保护系列实验

实验内容：细胞缺糖以及恢复有糖培养后hsp70的表达

主要实验技术：免疫细胞化学，显微镜摄影

材料与操作：

•        96孔板8块、CHL细胞

•        2个班公用1块板，使用前照射半小时。每班8组，96孔板重复使用，周边留空。每组接种细胞6孔、200ul

•        细胞消化后，加2ml培液，弃1ml后，再加10ml培液，全班共加48孔，960ul

•        做细胞损伤模型（与实验二同），但要再提早一天，实验前一天要饭前洗涤、固定、封闭、饭后课前加一抗（hsp抗体）

•        上午课后洗涤加二抗，下午2：00上课

要领：1、严格按照操作时间

2、洗涤要轻，吸用抢，加用滴管，稍倾斜，（细胞易脱落）

3、终止时间镜下控制约30”

4、电脑成像系统