细胞损伤与保护系列实验
实验二细胞损伤与修复
主要实验技术：MTT法检测细胞活力，细胞器的分离与鉴定
材料：
1、 96孔板8块：
2个班公用1块板，使用前照射半小时8组，96孔板重复使用，周边留空。每组接种细胞9孔、200ul。每班
2、 细胞7瓶：
4瓶传代——8瓶
2瓶（每桌1瓶）加2ml培液悬液，弃1ml后再加10mlDMEM液，每组9孔，200ul做MTT
1瓶加6mlDMEM液接种小盖3瓶（电镜）
操作：
小盖片培养瓶3瓶（1组）， 96孔板9孔（8组），
25ml培养瓶8瓶（ 4组）
二、次日中午饭前，细胞换液（损伤）
1、3瓶含小盖片培养瓶（电镜）
2瓶正常、4瓶损伤
2、每组96孔板9孔（活率）
3孔正常、6孔损伤
三、下午课后5点，细胞换液（损伤恢复）
4瓶损伤小盖片中2瓶、 6孔损伤中3孔
四、下午1:30继续实验
要领：1、细胞接种时要计数，以计算出接种量，约2ml冲打后，再加10ml
2、 一上课即加MTT
3、 蔗糖密度与细胞器的密度接近，使得细胞器在差速离心时更好分离细胞器
4、酶标仪的使用
